Pasożyty pakiet 4 – przywry met. PCR

Opis

Test polega na analizie kału na obecność DNA przywr: Przywra krwi, Motylica wątrobowa, Opistorchis viverrini

Objawy choroby pasożytniczej wywołanej obecnością przywry (fasciolozy):

– początkowo występują skórne reakcje alergiczne lub odczyny hematologiczne (niedokrwistość i niedobór żelaza),

– po kilku tygodniach objawy zaostrzają się i przypominają objawy obserwowane w wirusowym zapaleniu wątroby:

– ból w okolicach wątroby

– złe samopoczucie, osłabienie

– nudności

– biegunki

– stany gorączkowe

– brak apetytu

– narastająca żółtaczka oraz zmiany włókniste wokół pasożytów i zajętych przez nie przewodów żółciowych, które w efekcie końcowym prowadzą do marskości wątroby.

Choroba pasożytnicza nie dotyczy tylko dzieci lub osób nie dbających o higienę, może nią być dotknięty każdy człowiek. Ograniczenia dotychczasowej diagnostyki chorób pasożytniczych oraz częsty brak objawów wczesnej infekcji mogą być przyczyną trudności w postawieniu właściwej diagnozy.

Dotychczasowa diagnostyka opiera się na metodach bezpośrednich – wykryciu pasożyta lub jego jaj pod mikroskopem – oraz rzadziej na metodach pośrednich (np. lamblie zwykle wykrywa się metodą immunofluorescencji bezpośredniej – DFA). Wymagane jest kilkukrotne powtórzenie badania (np. 3 razy w odstępach kilku dni), które zwiększa czułość prowadzonej diagnostyki.

Jedna z metod diagnostycznych polega na przygotowaniu bezpośredniego preparatu mikroskopowego – poszukuje się np. trofozoitów i cyst pierwotniaków jelitowych lub zakłada się w laboratorium hodowle – dlatego próbki muszą być przesłane natychmiast po pobraniu (w ciągu 15 min), bez schłodzenia, szczególnie jeśli podejrzewa się zarażenie pasożytami wrażliwymi na zmianę temperatury (lamblie).

Ograniczenia dotychczasowej diagnostyki chorób pasożytniczych:

– obarczone wysokim ryzykiem otrzymania wyniku fałszywie negatywnego:

• w badanej próbce nie znajdują się akurat fragmenty pasożyta lub jego jaja
• tzw. „okienko serologiczne” w przypadku badań immunologicznych (brak przeciwciał ze względu na wczesną fazę zakażenia)

– ryzyko wyników fałszywie dodatnich

• pomylenie jaj np. glisty z pyłkami roślinnymi w obrazie mikroskopowym
• przeciwciała są obecne we krwi nawet kilka lat mimo wyleczenia

– konieczność wielokrotnego powtarzania badania, bez gwarancji wykrycia pasożyta

– wysoki koszt diagnostyki przy wielokrotnym powtarzaniu badania

Zalety diagnostyki chorób pasożytniczych metodą Real-Time PCR:

– wysoka czułość (4 kopie DNA w badanej próbce)

– wysoka specyficzność (pewność przynależności gatunkowej stwierdzonego pasożyta)

– wykonanie testu z 1 próbki kału, brak konieczności powtarzania badania

– możliwość wykrycia do 9 różnych pasożytów w 1 badaniu (pakiet 3)

– szybki wynik (5 dni roboczych)

Wskazania do wykonania testu metodą Real-Time PCR:

– obecność objawów klinicznych wskazujących na chorobę pasożytniczą mimo negatywnych wyników badania kału (metodami obserwacji mikroskopowej lub met. immunologicznymi)

Warianty testu:

Pasożyty pakiet 1: Tasiemiec uzbrojony, tasiemiec bąblowiec, włosogłówka, glista ludzka (kał)

Pasożyty pakiet 2: Dientamoeba fragilis, Blastocystis hominis (kał)

Pasożyty pakiet 3: Tasiemiec uzbrojony, Tasiemiec bąblowiec, Włosogłówka, Glista ludzka, Dientamoeba fragilis, Blastocystis hominis, Lamblie, Entamoeba histolytica, E. diaspar (kał)

Pasozyty pakiet 4: przywry (Przywra krwi, Motylica wątrobowa, Opistorchis viverrini) (kał + mocz)

Pasożyty pakiet 5: nicienie (owsiki, tęgoryjec dwunastnicy/ancylostoma ceylanicum) (kał, wymaz na owsiki)

Pasożyty pakiet 6- pełzakowica (Entamoeba histolytica, E. diaspar)

Pasożyty – Lamblie: Giagdia lamblia (kał)

Pasożyty – Cryptosporidium parvum